La Bibliothèque Mazarine est une bibliothèque publique, ouverte aux lecteurs et aux visiteurs du lundi au samedi de 10h à 18h (du lundi au vendredi en période estivale). Les fermetures exceptionnelles sont signalées dans l'agenda.

La salle de lecture de la Bibliothèque Mazarine, desservie par un escalier de 44 marches, n’est pas accessible aux personnes à mobilité réduite. La consultation de documents de ses collections est néanmoins possible pour les personnes à mobilité réduite, qui seront accueillies, sur rendez-vous, dans un espace spécifique.

Les visites libres de la Bibliothèque sont autorisées : accès libre aux horaires d'ouverture pour les visiteurs individuels, dans la limite de 5 personnes par groupe, identifiées au moyen d'un badge "visiteur" remis par l'accueil de l'Institut de France.